小鼠臭氧暴露实验流程从系统搭建到实验结束

常见的小鼠臭氧暴露系统主要包括：

气源可以根据实验要求采用空气泵、洁净空气或空气钢瓶。流量计用于控制进入暴露仓的气体流量，臭氧发生器负责产生臭氧。

暴露仓应具有良好的密封性和气体混合能力，并设置臭氧检测口。臭氧检测仪用于实时监测仓内臭氧浓度，尾气出口连接臭氧尾气破坏器，对排出的臭氧进行分解处理。

建议：对于动物实验，应根据小鼠数量、暴露仓体积和气体流量合理设计系统，保证仓内气体能够充分交换和混合。

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1. 实验前检查

实验开始前，检查气源、臭氧发生器、流量控制装置、暴露仓、臭氧检测仪和尾气破坏器。

重点检查暴露仓密封性、管路连接以及尾气处理是否正常，确认臭氧检测仪能够正常工作。

动物应按照实验方案提前完成分组和准备，尽量缩短后续开仓操作时间。

2. 空仓运行，建立目标浓度

正式放入小鼠前，先关闭暴露仓，使其处于空仓状态。

开启气源，设定实验所需气体流量，启动臭氧发生器，使臭氧进入暴露仓。通过臭氧检测仪连续监测仓内臭氧浓度。当检测值达到实验设定的目标浓度，并经过一定时间保持稳定后，完成空仓浓度确认。

注意：空仓达到目标浓度并不意味着正式动物暴露已经开始。这一阶段主要用于确认系统能够达到预期工作状态。

3. 停止臭氧供应，再放入小鼠

这是整个流程中非常关键的一步。

空仓浓度达到要求后，先停止臭氧发生器，并停止向暴露仓输送臭氧气体。在实验室安全条件允许的情况下，快速打开暴露仓，将已经准备好的小鼠放入仓内，然后立即关闭仓门。

这样可以避免在仓门打开时，臭氧发生器仍然持续产气并向暴露仓送入臭氧，从而减少臭氧从仓门直接逸散。

注意：停止臭氧发生并不等于仓内没有臭氧。此时暴露仓内仍然存在残余臭氧，开仓操作仍应尽量缩短时间。

建议：如果实验室明确要求臭氧操作必须在局部排风条件下进行，则放鼠操作应在通风橱、局部排风罩或符合实验室要求的专用操作区域内完成。

4. 关闭暴露仓，重新建立臭氧浓度

小鼠放入后立即关闭暴露仓，恢复气源和气体流量，并重新启动臭氧发生器。

由于小鼠进入暴露仓后，仓内气流状态、气体交换以及臭氧消耗情况都会发生变化，因此此时臭氧浓度可能与空仓状态不同。通过臭氧检测仪实时监测仓内浓度，并根据实验方案调整臭氧发生器输出和气体流量，使实际暴露条件逐步恢复到目标值。

5. 达到稳定条件后开始正式暴露

当小鼠已经处于暴露仓内，臭氧浓度重新达到实验设定值并保持稳定后，再按照实验方案开始计算正式暴露时间。

实验过程中持续记录臭氧浓度和暴露时间，必要时同步记录温度、湿度、气体流量等参数。相比单纯记录臭氧发生器的设定值，实际暴露期间的臭氧检测数据更能反映动物所处的实验环境。

小鼠进入后，臭氧浓度可能出现一定波动，因此建议采用在线臭氧检测。

典型控制方式

检测仪实时反馈暴露仓臭氧浓度，实验人员根据实验方案调整臭氧发生器输出或气体流量。

注意：如果使用泵吸式臭氧检测仪，应合理设置检测流量，避免检测支路抽气量过大而改变暴露仓整体气流条件。

建议：检测点应具有代表性，不能简单将检测口设置在臭氧进气口附近，否则测得的浓度可能不能代表动物实际暴露环境。

达到规定暴露时间后，应先停止臭氧发生器，停止臭氧供应。

随后根据系统设计继续通入无臭氧气体，对暴露仓进行置换和吹扫，并保持尾气破坏器正常工作。

注意：不能因为臭氧发生器已经停止，就认为暴露仓内没有臭氧。实验结束时应先置换吹扫，确认安全后再开仓。

对于高校和科研院所常见的小鼠臭氧暴露实验，可以采用：

配合合理的进气、检测、排气和置换设计，可以实现臭氧浓度监测、动物暴露以及尾气处理的一体化。

建议：如果实验室不允许臭氧在开仓操作时逸散，则重点是优化"放鼠前停止臭氧—快速开仓—立即关仓—重新建浓度—稳定后正式暴露"这一操作流程。

对于需要长期开展小鼠、大鼠臭氧吸入暴露实验的实验室，建议将臭氧发生器、流量控制、暴露仓、在线臭氧检测和尾气破坏作为一个完整系统进行设计，以提高实验条件的稳定性和重复性。